Enzymatische Dissoziation

1. Stellen Sie Ihre Zellkulturflasche mit Ihrer adhärenten Zelllinie unter die Laminar-Flow-Haube. Entfernen Sie das Medium und achten Sie darauf, die Zellschicht nicht zu zerstören. Waschen Sie Ihre Zellen mit warmer Waschlösung (z. B. D-PBS), indem Sie diese vorsichtig in den Kulturflaschen pipettieren und die Kulturflasche vorsichtig in einer "8"-Bewegung schwenken. Verwerfen Sie die Waschlösung.
   
   
2. Geben Sie das Disassoziationsmittel (z.B. Trypsin, oder Accutase) hinzu und schwenken Sie die Kulturflasche vorsichtig, um die gesamte Oberfläche zu bedecken. Inkubieren Sie die Zellen 2-3 Minuten lang. Verwenden Sie unseren Timer, um die Zeit nicht aus den Augen zu verlieren. Beachten Sie, dass die Zeit für den Aufschluss stark vom Zelltyp und dem Disassoziationsmittel abhängig ist.
   
   
3. Nach der Inkubationszeit die Zellen herausnehmen und unter dem Lichtmikroskop auf Ablösung prüfen. Sie können den Vorgang durch vorsichtiges Klopfen auf das Kulturgefäß erleichtern. Sobald sich die Zellen abgelöst haben (sie erscheinen unter dem Mikroskop runder), stoppen Sie die Wirkung des Dissoziationsmittels durch Zugabe von vorgewärmtem Zellkulturmedium. Resuspendieren Sie die Zellen und sammeln Sie sie in einem 15 oder 50 ml Zentrifugenröhrchen.

Für Zelllinien, die anfällig für Proteasen sind, kann eine mechanische Dissoziationsmethode besser geeignet sein. Wir bieten eine breite Palette von Schabern an, um Ihren Anforderungen gerecht zu werden.

Bereiten Sie die Zellen für die Aussaat, das Einfrieren oder andere zellbasierte Analysen vor, indem Sie sie zählen.