Der Begriff Zellkultur wird häufig verwendet, um eine Reihe von Labortechniken zu beschreiben, die das Wachstum und die Vermehrung von eukaryotischen und prokaryotischen Zellen unter kontrollierten Bedingungen ermöglichen. Trotz der Unterschiede in der Zellkulturpraxis zwischen den einzelnen Labors und Zelllinien lässt sich die Zellkulturarbeit häufig wie in der oberen Abbildung dargestellt zusammenfassen. Unser Ziel ist es, Sie bei jedem Schritt zu unterstützen, indem wir Ihnen eine einfache und angemessene Materialauswahl anbieten, die auf Ihre Bedürfnisse zugeschnitten ist.

Ausgehend vom Auftauen der von Ihnen gewählten Zelllinie werden wir kurz die üblichen Praktiken bei der Inkubation beschreiben. Wenn der verfügbare Platz im Zellkulturgefäß fast erschöpft ist (ca. 80 % Konfluenz), müssen die Zellen in ein neues Gefäß überführt werden, um weiteres Zellwachstum zu ermöglichen. Dieser Schritt, der auch als Passage bezeichnet wird, ist notwendig, um Kontakthemmung und Nährstoffmangel aufgrund von zu hohen Zellzahlen zu vermeiden, die die Zellproliferation hemmen können.

Bei der Passage werden die adhärenten Zellen aus ihrem Kulturgefäß gelöst - dieser Schritt ist bei Suspensionszelllinien nicht erforderlich - und gezählt, um dann in der gewünschten Konzentration in ein anderes Gefäß ausgesät zu werden. Die entstandene Subkultur wird dann erneut inkubiert, wobei regelmäßig das Medium gewechselt wird, bis der Grenzwert für die Konfluenz erneut erreicht wird. Bei jeder Passage können überschüssige Zellen für andere Zwecke isoliert werden, insbesondere für die Kryokonservierung, zellbasierte Assays und die Extraktion von DNA/RNA/Proteinen. Schließlich müssen alle verbleibenden Zellen in geeigneter Weise im Autoklaven dekontaminiert werden.

Bitte bedenken Sie, dass die Zellkulturbedingungen für jeden Zelltyp unterschiedlich sind. Diese Seite soll lediglich einen Überblick über die üblichen Zellkulturverfahren geben und die für Ihre Arbeit am besten geeigneten Materialien vorstellen. Detaillierte Protokolle finden Sie immer in den Originalanweisungen, die Ihrer spezifischen Zelllinie beiliegen.